（供医学检验专业五年制本科使用）

医学检验系临床生物化学检验教研室编

2011年3月

Ⅰ前言

分子生物学检验技术是运用分子生物学技术分析疾病基因、从分子水平分析疾病发生的原因、跟踪疾病发展过程、检验感染人类的病原生物以及根据基因多态性指导个体化治疗的一门学科。通过实验课程的学习，主要是加强本课程的实际操作技能，为学生进入临床实习和临床工作打下良好的理论基础和实验室动手能力。

本大纲适用于医学检验专业本科学生使用。现将大纲使用中有关问题说明如下：

一、为了使教师和学生更好地掌握教材，每一实验均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解三个级别，教学内容与教学要求级别对应。

二、使教师在保证大纲核心内容的前提下，可根据不同教学手段，讲授重点内容和介绍一般内容。

三、总教学参考学时为12学时。

四、教材：自编《分子生物学检验技术实验讲义》。

Ⅱ 正文

实验一 外周血有核细胞DNA制备

一教学目的

掌握NaI法制备外周血有核细胞DNA。

二教学要求

通过制备外周血有核细胞DNA，掌握DNA抽提的原理、方法和基本步骤，学习琼脂糖凝胶电泳的制备。

三教学内容

1．制备外周血有核细胞DNA。

2．琼脂糖凝胶电泳分析DNA。

实验二 质粒DNA的酶切鉴定

一教学目的

掌握限制性内切酶酶切的原理和方法。

二教学要求

通过对质粒进行限制性内切酶酶切，掌握酶切的原理和基本步骤，能够通过酶切作用鉴定质粒。

三教学内容

1．质粒的限制性内切酶酶切鉴定。

2．琼脂糖凝胶电泳分析实验结果。

实验三聚合酶链反映（PCR）

一教学目的

熟悉PCR的基本原理，掌握PCR的基本操作技术。

二教学要求

通过扩增目的基因片段，学习PCR的基本原理，掌握操作技术。

三教学内容

1.DNA纯度测定。

2.PCR扩增目的基因。

3.琼脂糖凝胶分析实验结果。

Ⅲ教学组织与方法

一实施机构：由医学检验系临床生物化学教研室执行。

二 组织内容：教案讲义审核、集体教学备课、教学方法研究、教学手段应用。

三 教学方法

1.实验教学：要强调学员通过实验理解分子生物学主要实验技术的基本原理，掌握注意事项，进行正规操作训练，培养严格的科学作风和综合分析能力。学员按规程完成实验，记录实验现象和结果，进行分析讨论，写出实验报告。教学组要保障实验课仪器、材料供应，教师课前完成预实验，保证90%以上学员能成功完成实验。

2.教学点：在医学检验系实验室教学，承担教师由临床生物化学教研室委派。

3.辅导形式：课堂答疑、讨论、复习等结合。

四 考核办法：实验考试占总评成绩的20%，实验课平时成绩占总评成绩的10%。

Ⅳ 教学时数分配表

	实验内容	时数	实验类型
实验一	外周血有核细胞DNA制备	4	验证实验
实验二	质粒DNA的酶切鉴定	4	验证实验
实验三	聚合酶链反映（PCR）	4	验证实验